細(xì)胞無血清培養(yǎng)基被廣泛的應(yīng)用于培養(yǎng)哺乳動物和無脊椎動物細(xì)胞以制備單克隆抗體，病毒抗原和重組蛋白等。大多數(shù)的無血清培養(yǎng)基含有向細(xì)胞內(nèi)轉(zhuǎn)運(yùn)離子的轉(zhuǎn)鐵蛋白和調(diào)節(jié)葡萄糖攝取量的胰島素，以及一些蛋白質(zhì)和清蛋白，纖維蛋白，胎球蛋白等，這些蛋白在細(xì)胞培養(yǎng)中發(fā)揮各種不同的功能，如提供細(xì)胞貼壁所需的基質(zhì)，抗生物反應(yīng)器剪切力，作為脂質(zhì)和其他生長分化因子的載體等。
無血清培養(yǎng)基應(yīng)用的優(yōu)點(diǎn)：
?。?）成分的限定性；
?。?）產(chǎn)品質(zhì)量一致性；
?。?）簡化生產(chǎn)過程；
?。?）易于控制培養(yǎng)環(huán)境；
?。?）細(xì)胞類型的優(yōu)化配方。
無血清培養(yǎng)基應(yīng)用
1、DC細(xì)胞、CIK細(xì)胞和NK細(xì)胞的長期增殖培養(yǎng)
2、PBL細(xì)胞和TIL細(xì)胞的長期增殖培養(yǎng)
3、單核細(xì)胞和巨噬細(xì)胞的長期增殖培養(yǎng)
4、T淋巴細(xì)胞的長期增殖培養(yǎng)
細(xì)胞無血清培養(yǎng)基使用方法
1、采集與分離外周血采集外周血，F(xiàn)icoll密度梯度離心分離收集單個核細(xì)胞。
2、單個核細(xì)胞的接種與誘導(dǎo)活化
1)0d時，繃胞計數(shù)。按細(xì)胞密度2x106cell/mL接種至對應(yīng)體積的培養(yǎng)液中。添加誘導(dǎo)因子YC001一支。添加10%比例的自體血漿。
2)1d時(24小時)，添加誘導(dǎo)因子YC002、YC003、YC004至已經(jīng)接種細(xì)胞的培養(yǎng)液中。將YC005添加至未經(jīng)使用的培養(yǎng)基中，待用。
3、細(xì)胞的連續(xù)培養(yǎng)與擴(kuò)增
1)3d時，補(bǔ)入新鮮培養(yǎng)液，調(diào)整細(xì)胞密度至(0.6-0.8)x106cell/mL。同時添加新加入培養(yǎng)液體積l10%比例的自體血漿。補(bǔ)液比例大致在1：2左右（原有培養(yǎng)液體積：新加培養(yǎng)液體積）
2)5d時，補(bǔ)入新鮮培養(yǎng)液，調(diào)整細(xì)胞密度至(0.6-0.8)x106cell/mL。補(bǔ)液比例大致在1：3左右。
3)7d時，補(bǔ)入新鮮培養(yǎng)液，調(diào)整細(xì)胞密度至(06-08）x106cell/mL。補(bǔ)液比例大致在1：2左右。
4)9d時，將剩余培養(yǎng)液全部加入。
4、收獲細(xì)胞
培養(yǎng)周期結(jié)束后，依據(jù)細(xì)胞量收獲細(xì)胞。
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