無(wú)血清免疫細(xì)胞培養(yǎng)基是繼天然培養(yǎng)基,合成培養(yǎng)基之后的第三類(lèi)培養(yǎng)基。與傳統(tǒng)的培養(yǎng)基相比較,無(wú)血清培養(yǎng)基是不含動(dòng)物血清或其他生物提取液,但仍可以維持細(xì)胞在體外較長(zhǎng)時(shí)間生長(zhǎng)、繁殖的一種培養(yǎng)基。無(wú)血清培養(yǎng)基由于其組成成分相對(duì)清楚,制備過(guò)程簡(jiǎn)單,在現(xiàn)代生物技術(shù)學(xué)領(lǐng)域得到廣泛應(yīng)用。無(wú)血清培養(yǎng)技術(shù)也是闡明細(xì)胞生長(zhǎng),增值,分化及基因表達(dá)調(diào)控的基礎(chǔ)研究問(wèn)題的有力工具。
通常,動(dòng)物細(xì)胞的生長(zhǎng)均有賴(lài)于血清的存在,在普通培養(yǎng)基中,如不加血清,絕大部分細(xì)胞不能增殖。目前,血清培養(yǎng)基中通常添加的比較好的血清是牛血清。經(jīng)研究發(fā)現(xiàn)細(xì)胞培養(yǎng)中使用牛血清存在污染外源病毒和致病因子的風(fēng)險(xiǎn):由于不同批次牛血清間的生物活性和因子的不一致,導(dǎo)致產(chǎn)品和實(shí)驗(yàn)結(jié)果的重現(xiàn)性差:制品中殘留的牛血清易引起接種者對(duì)血清的過(guò)敏反應(yīng)。
目前,無(wú)血清免疫細(xì)胞培養(yǎng)基的研究有兩個(gè)方向:一是培養(yǎng)基中不含有任何動(dòng)物來(lái)源的添加組分;二是培養(yǎng)基中不含有不明確的添加組分。依此可以將當(dāng)前應(yīng)用較多的無(wú)血清培養(yǎng)基歸納為以下四種:
1、一般意義上的無(wú)血清培養(yǎng)基,用各類(lèi)可代替血清功能的生物材料配制細(xì)胞培養(yǎng)基,如牛血清白蛋白(BSA),轉(zhuǎn)鐵蛋白,胰島素等生物大分子物質(zhì),以及從血清中提取的去除蛋白質(zhì)的混合脂類(lèi)以及水解蛋白等。其特點(diǎn)是培養(yǎng)基中的蛋白含量較高,添加物質(zhì)的化學(xué)成分不明確,其中含有大量的動(dòng)物來(lái)源蛋白。
2、無(wú)動(dòng)物來(lái)源培養(yǎng)基:許多商業(yè)公司開(kāi)發(fā)的無(wú)動(dòng)物來(lái)源培養(yǎng)基是基于生產(chǎn)重組藥物的安全考慮,培養(yǎng)基中的添加組分無(wú)動(dòng)物來(lái)源,需要的蛋白來(lái)源于重組蛋白或者蛋白水解物,這些組分可以保障細(xì)胞生長(zhǎng)及增殖的需要。
3、無(wú)動(dòng)物蛋白培養(yǎng)基:培養(yǎng)基*不用動(dòng)物來(lái)源的蛋白,但仍有部分添加物是來(lái)源于植物蛋白的水解片段或合成多肽片段等其他衍生物。此類(lèi)培養(yǎng)基組分相對(duì)穩(wěn)定,但必須添加類(lèi)固醇激素和脂類(lèi)前體,并且對(duì)培養(yǎng)的細(xì)胞是高度特異性的。
4、化學(xué)組分限定培養(yǎng)基,此類(lèi)培養(yǎng)基是目前安全的,最為理想的培養(yǎng)基,首先可以保證培養(yǎng)基批次間的一致性,其中所添加的少量動(dòng)物來(lái)源的蛋白水解物、蛋白都是成分明確的組分。其特點(diǎn)是培養(yǎng)基的性質(zhì)確定,配起培養(yǎng)基來(lái)也比較方便。